EHEB慢性B細(xì)胞白血病

細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項：

1、如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細(xì)胞即時離心，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進(jìn)解決
2、貼壁細(xì)胞生長緩慢；適當(dāng)提高血清濃度（最高不能超過20%），或可根據(jù)該細(xì)胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)
3、生長不均：貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重懸打散細(xì)胞，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)
 細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請嚴(yán)格遵照無菌操作）
1、吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時間，通?？刂圃?-2min）
2、鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ粢让?，加6-8ml*培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散
3、細(xì)胞取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
4、注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存
特別注意：（如使用公共實驗室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng)）
1、收到細(xì)胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清，（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時）
2、貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)
3、如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室CRL-5870    NCI-H1435 Cells    ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗，能提供細(xì)胞培養(yǎng)*的技術(shù)支持，讓您實驗再無煩擾！

 EHEB慢性B細(xì)胞白血病

注：（1），觀察細(xì)胞在低倍鏡（4或5X物鏡）下進(jìn)行，否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度?？醇?xì)胞的形態(tài)請在10X或20X物鏡下。

(2)，瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用，請換用加雙抗或無雙抗的新培養(yǎng)基，細(xì)胞凍存后，培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。

(3)，有些細(xì)胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞脫落，可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。

常見問題及解決方案

1、培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：極大可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決。  2、細(xì)胞漂浮：培養(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細(xì)胞大部分又貼回瓶底，表明細(xì)胞活力正常，剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉，留 10ml 培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細(xì)胞生長至匯合度 80%，進(jìn)行消化傳代；如細(xì)胞還是不貼壁，將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo)，直到問題解決。

其它系列產(chǎn)品:VI (CA6) 
SEF472Hu    人透明質(zhì)酸合酶2(HAS2)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Hyaluronan Synthase 2 (HAS2) 
SEH319Hu    人脯氨酸/精氨酸豐富端亮氨酸豐富重復(fù)蛋白(PRELP)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Proline Arginine Rich End Leucine Rich Repeat Protein (PRELP) 
SEJ103Hu    人絲聚蛋白(FLG)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Filaggrin (FLG) 
SEK204Hu    人血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶4(ADAMTS4)ELISA試劑盒    ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 4 (ADAMTS4) 
SEJ256Hu    人δ樣蛋白4(δLL4)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Delta Like Protein 4 (dLL4) 
SEB779Hu    人含CUB域蛋白1(CDCP1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for CUB Domain Containing Protein 1 (CDCP1) 
SEL329Hu    人補體因子H相關(guān)蛋白3(CFHR3)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Complement Factor H Related Protein 3 (CFHR3) 
SEA489Hu    人角蛋白4(KRT4)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Keratin 4 (KRT4) 
SED133Hu    人ⅩⅣ型膠原(COL14)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Collagen Type XIV (COL14) 
SEJ348Hu    人剪切多聚腺苷酸化特異性因子1(CPSF1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Cleavage And Polyadenylation Specific Factor 1 (CPSF1) 
SEQ820Hu    人Enah/Vasp樣蛋白(EVL)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Enah/Vasp Like Protein (EVL) 
SEA940Hu    人趨化因子C-X-C-基元受體4(CXCR4)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Chemokine C-X-C-Motif Receptor 4 (CXCR4) 
SEK032Hu    人含V-Set域T細(xì)胞激活抑制因子1(VTCN1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for V-Set Domain Containing T-Cell Activation Inhibitor 1 (VTCN1) 
SEF128Hu    人不均一核核糖核蛋白U(HNRPU)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Heterogeneous Nuclear Ribonucleoprotein U (HNRPU) 
SEC722Hu    人前折疊蛋白亞基1(PFDN1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Prefoldin Subunit 1 (PFDN1) 
SEM762Hu    人蝰蛇毒素(Viperin)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Viperin 
SEL930Hu    人信號素3F(SEMA3F)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Semaphorin 3F (SEMA3F) 
SEA730Hu    人骨成型蛋白受體1B(BMPR1B)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein Receptor 1B (BMPR1B) 
SEK073Hu    人Zeste同源物增強子2(EZH2)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Enhancer Of Zeste Homolog 2 (EZH2) 
SEE651Hu    人微小染色體維持缺陷蛋白5(MCM5)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Minichromosome Maintenance Deficient 5 (MCM5) 
SEE110Hu    人肝配蛋白A4(EFNA4)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Ephrin A4 (EFNA4) 
SEC709Hu    人前妊娠蛋白關(guān)聯(lián)子宮內(nèi)膜蛋白(PAEP)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Progestagen Associated Endometrial Protein (PAEP) 
SEA781Hu    人CD276分子(CD276)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 276 (CD276) 
SEF421Hu    人衰老關(guān)鍵蛋白4(FBLN4)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Fibulin 4 (FBLN4) 
SEL761Hu    人氨酰tRNA合成酶復(fù)合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Aminoacyl tRNA Synthetase Complex Interacting Multifunctional Protein 1 (AIMP1) 
SED809Hu    人堿性唾液脯氨酸豐富蛋白2(PRB2)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Basic Salivary Proline Rich Protein 2 (PRB2) 
SED810Hu    人堿性唾液脯氨酸豐富蛋白1(PRB1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Basic Salivary Proline Rich Protein 1 (PRB1) 
SEQ088Hu    人Dickkopf相關(guān)蛋白4(DKK4)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Dickkopf Related Protein 4 (DKK4) 
SEG151Hu    人天冬氨酸β羥化酶(ASPH)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Aspartate Beta Hydroxylase (ASPH) 
SEF879Hu    人分泌型卷曲相關(guān)蛋白2(SFRP2)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Secreted Frizzled Related Protein 2 (SFRP2) 
SEN690Hu    人含膠原三螺旋重復(fù)蛋白1(CTHRC1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Collagen Triple Helix Repeat Containing Protein 1 (CTHRC1)